silymarine extractieproces
Silymarin, wordt een mengsel van flavonolignanen met veel farmacologische activiteiten verkregen uit de vruchten van mariadistel (Silybum marianum L. Gaertner). Vanwege het hoge lipidegehalte in distelvruchten beveelt de Europese farmacopee een proces in twee stappen van de extractie aan. Ten eerste worden de vruchten 6 uur belaster, met behulp van n-hexaan; ten tweede wordt silymarine nog 5 uur geëxtraheerd met methanol.
De gepresenteerde gegevens tonen aan dat dit extreem lange traditionele Soxhlet-extractieproces kan worden verkort tot een paar minuten met behulp van vloeistofextractie onder druk (PLE). PLE maakt het ook mogelijk om de ontvettingsfase die vereist is in de traditionele procedure te elimineren, waardoor de silymarineextractieprocedure wordt vereenvoudigd en silymarineverlies als gevolg van ontvetting wordt voorkomen. De PLE-terugvorderingen die onder de geoptimaliseerde extractieomstandigheden zijn verkregen, zijn duidelijk beter dan die welke zijn verkregen door de door Pharmacopoeia aanbevolen Soxhlet-extractieprocedure.
De PLE-opbrengsten van silychristine, silydianin, silybin A, silybin B, isosilybin A en isosilybin B in aceton zijn respectievelijk 3,3, 6,9, 3,3, 5,1, 2,6 en 1,5 mg/g van de niet-ontvette vruchten. De 5-h Soxhlet extractie met methanol op ontvet fruit geeft slechts ∼72% van de silymarine hoeveelheid verkregen in 10 min PLE bij 125°C.
Wat is Silybum?
Silybum marianum L. Gaertner, algemeen genoemd alsmariadistel, gezegende mariadistel, Mariadistel, Mariadistel of Mariadistel, is een eenjarige of tweejaarlijkse plant uit de familie Asteraceae. De plant, oorspronkelijk groeiend in Zuid-Europa en Azië, is nu over de hele wereld te vinden (1). Deze lastige wiet wordt momenteel gekweekt als medicinale plant en is een van de belangrijkste medicinale gewassen in Europa.
Mariadistel wordt al meer dan 2000 jaar gebruikt voor medicinale doeleinden, meestal voor de behandeling van leverziekten (cirrose en hepatitis), evenals voor de bescherming van de lever tegen giftige stoffen (2–5). Recente onderzoeksinteresse in deze plant is gestimuleerd door studies die zijn uitzonderlijk hoge antitumoractiviteit aantonen. Extracten uit de plant worden nu intensief bestudeerd in de experimentele chemopreventie van kanker en in de verbetering van de bijwerkingen van chemotherapie (6). Recente rapporten hebben aangetoond dat extracten uit deze plant ook worden gekenmerkt door vele andere farmacologische activiteiten, zoals ontstekingsremmende en antifibrotische effecten (2, 7, 8).
Silymarine, een mengsel van flavonolignanen met veel farmacologische activiteiten, wordt verkregen uit de zaden van mariadistel (Silybum marianum L. Gaertner). De gemeenschappelijke procedures die tot nu toe worden gebruikt voor silymarineextractie zijn voornamelijk gebaseerd op langzame oplosmiddelextractiemethoden op hoge temperatuur. De nadelen van deze technieken hebben geleid tot het zoeken naar nieuwe alternatieve extractieprocessen die bovendiensilymarine extractenKwaliteit. Dit laatste is met name van belang voor de toepassing van silymarine. De verkregen silymarine-extracten kunnen in feite giftige organische residuen bevatten die moeten worden verwijderd om aan de aanvaardbaarheid van de consument te voldoen.
In de poging om het proces van silymarineextractie te verbeteren en effectiever en milieuvriendelijker te maken, zijn onlangs oplosmiddelextractie onder microgolfondersteunde oplosmiddelen, ultrasone hulpvloeistofextractie, vloeistofextractie onder druk, enzymondersteunde extractie, superkritische vloeistofextractie en vooral subkritische waterextractie, ook bekend als methoden voor de extractie van heet water onder druk, ontwikkeld en toegepast.
Materialen en methoden
Plantaardig materiaal
Gedroogde vruchten van S. marianum L. Gaertner werden in het najaar van 2011 gekocht bij een lokale apotheek (Lublin, Polen). Een voldoende groot representatief monster van het plantmateriaal (ca. 500 g) werd gemalen en gezeefd om de deeltjesgrootte van 0,4 mm te verkrijgen. Nauwkeurig gewogen delen van het materiaal werden gebruikt voor extracties.
Materialen en reagentia
Het gestandaardiseerde droge extract van S. marianum L. Gaertner en silybin B (met een zuiverheid van 98%), toegepast als normen, werd gekocht van Sigma-Aldrich, Polen. Aceton, ethylacetaat, fosforzuur, n-hexaan (allemaal van analytische reagenskwaliteit) en methanol (analytische reagenskwaliteit en HPLC-kwaliteit) werden gekocht bij de Poolse chemische fabriek (POCh, Gliwice, Polen). Water werd gezuiverd met behulp van een Milli-Q systeem van Millipore (Millipore, Bedford, MA, USA). Neutraal glas, verkregen als geschenk van lokale glasfabrieken (fractie 0,4-0,6 mm), werd aangebracht als dispergeermiddel in de PLE-cel.
Vloeistofextractie onder druk
PLE werd uitgevoerd met een Dionex ASE200 instrument (Dionex Corp., Sunnyvale, CA, USA). Het plantmateriaal (0,5 g) werd gemengd met inert materiaal (neutraal glas) en in een roestvrijstalen extractiecel van 22 ml met filterpapier aan de onderkant geplaatst. Een andere cirkel van filterpapier werd aan de bovenkant van de extractiecel geplaatst. Tot slot werd de cel goed gesloten en in de verwarmingsoven geplaatst.
De inhoud van de cel werd geëxtraheerd bij de bedrijfsdruk van 60 bar. Aan het einde van het proces werd het geëxtraheerde monster gespoeld met behulp van het oplosmiddelvolume dat gelijk is aan 60% van dat van de extractiecel. Ten slotte werd het monster gezuiverd voor 60 s met stikstof onder druk (150 psi.), en het extract werd verzameld in een glazen flacon van 60 ml met een met Teflon bedekte rubberen dop. Het volume van het verzamelde extract lag tussen 25 en 31 ml, afhankelijk van de verpakkingsdichtheid van de extractiecel. Het verkregen extract werd overgebracht in een volumetrische kolf van 50 ml en gevuld tot het volume ervan met behulp van een geschikt oplosmiddeltype. Drie onafhankelijke extracties werden onder dezelfde omstandigheden uitgevoerd. Tussen de runs door werd het systeem gewassen met een geschikt extractiemiddel.
Ple-parameters in studie waren oplosmiddeltype (methanol, aceton en ethylacetaat), temperatuur (50, 75, 100, 125 en 150 °C), tijd (5, 10, 15 en 20 min) en het aantal extractiecycli (1–5). Voor het PLE-ontvettingsproces werd n-hexaan als oplosmiddel aangebracht en de onderzochte parameters waren temperatuur (50 en 100°C) en tijd (5 en 10 min) lipidenverwijdering. Aceton- en ethylacetaatextracten werden onder vacuüm tot droogheid verdampt en opnieuw opgelost in methanol vóór chromatografische analyse.
Soxhlet extractie
Uitputtende extracties in het Soxhlet-apparaat werden uitgevoerd met behulp van 2,0 g porties van het materiaal. Nauwkeurig gewogen monsters werden overgebracht naar een papieren vingerhoed. De geladen vingerhoed werd in een 100 ml Soxhlet extractor gestoken. Extracties werden uitgevoerd in het tweestapsproces (n = 3). In de eerste stap van de procedure werd het plantmateriaal gedurende 6 uur ontvet met 75 ml n-hexaan. In de tweede werd silymarine gedurende 5 uur geëxtraheerd met 75 ml methanol. Na afkoeling tot kamertemperatuur werd het verkregen extract overgebracht naar een volumetrische kolf van 100 ml, die vervolgens werd gevuld tot het volume met methanol. Er werden drie onafhankelijke extracties uitgevoerd.
Chromatografische analyse van extracten
HPLC-metingen werden uitgevoerd op een Dionex Liquid Chromatograph (Dionex Corp.) bestaande uit een chromatografiebehuizing (LC20) met een PEEK geautomatiseerde injectieklep uitgerust met een 10- μL monsterlus, een gradiëntpomp (GP50), een absorptiedetector (AD25) en een fotodiode array detector (PDA100). Het hele chromatografische systeem stond onder controle van het PeakNet6 data acquisitie systeem. Chromatografische scheidingen werden uitgevoerd bij 40°C met behulp van een Prodigy ODS-2 kolom (5 μm, 250 × 4,6 mm, ID) (Phenomenex, Torrance, CA, USA). Mobiele fase A was een mengsel van methanol met waterige fosforzuuroplossing met 0,5 ml fosforzuur in 100 ml oplossing (35 : 65, v/v). Mobiele fase B was een mengsel van methanol met de waterige fosforzuuroplossing met 0,5 ml fosforzuur in 100 ml oplossing (50 : 50, v/v). Het debiet was 0,8 ml/min. De analyses werden uitgevoerd in een mobiele fasegradiënt waarbij het percentage B in A als volgt varieerde: initiële concentratie, 0%B; 28 min, 100%B; 35 min, 100%B, 36 min 0%B. Vóór de volgende analyse werd de kolom in evenwicht gehouden met behulp van de mobiele fase met 0%B gedurende 20 minuten. Elk extract werd drie keer door HPLC geanalyseerd. De golflengte voor het detecteren van flavonolignanen werd ingesteld op 288 nm, en de UV-Vis spectra van 210 tot 500 nm werden ook geregistreerd voor piekkarakterisering.
De kwalitatieve analyse van de extracten werd uitgevoerd door de retentietijden van de pieken en hun UV-Vis spectra in de extracten te vergelijken met die van het gestandaardiseerde droge silymarinemonster. Om de gestandaardiseerde droge silymarineoplossing te bereiden, werd een 0,02 g deel van het monster met 5,0 mg silybin A + B opgelost in 50 ml methanol. De pieken voor silychristin, silydianin, silybin A, silybin B, isosilybin A en B verschenen respectievelijk op retentietijden van 15,1, 17,4, 27,5, 29,1, 33,6 en 34,8 min. Kwantitatieve analyse was gebaseerd op de Silybin B-standaard en er werd een externe standaardmethode gebruikt. Uit vijf concentraties van de verbinding in het concentratiebereik van 0,1–1,0 mg/ml werd een kalibratiecurve gegenereerd. Voor elke concentratie standaardoplossing werden drie metingen van het piekgebied uitgevoerd. De karakteristieke parameters van de verkregen kalibratiecurve waren als volgt: helling, 0,516 en onderschepping, 0,003. De kalibratiecurve bleek lineair te zijn in het geteste concentratiebereik. De correlatiecoëfficiënt bleek >0,995 te zijn. Vanwege de moeilijkheid van de aankoop van silychristine, silydianin, silybin A, isosilybin A en B normen, werden de hoeveelheden van deze verbindingen berekend door hun chromatografische reacties te relateren aan de kalibratiecurve voor silybin B.
Statistische analyse
Alle gegevens worden uitgedrukt als gemiddelde ± standaarddeviatie (SD). De analyse van variantie (ANOVA) en F-test werd gebruikt om de invloed van PLE-omstandigheden op de silymarineopbrengst te beoordelen. De gemiddelde waarden werden als significant verschillend beschouwd wanneer het resultaat van vergeleken parameters verschilde op P = 0,05 significantieniveau. Om de betekenis van elke Fisher-coëfficiënt te controleren, werden de P-waarden gebruikt.
Resultaten
Figuur 1a toont een typisch chromatogram van PLE-extract verkregen uit de vruchten van S. marianum L. Gaertner, terwijl figuur 1b het chromatogram toont van silymarineextractie uit melkdisteloplossing bereid om het gestandaardiseerde droge extract van S. marianum L. Gaertner in methanol (1 mg/ml) op te lossen. De analyse van chromatogrammen van PLE- of Soxhlet-extracten met die voor gestandaardiseerde oplossing (retentietijden, UV-Vis spectra en piekzuiverheidsindex) bewees dat de toegepaste chromatografische omstandigheden een voldoende resolutie van de onderzochte verbindingen mogelijk maken, pieken genummerd van 1 tot 6, uit monstermatrixcomponenten. De pieken werden geïdentificeerd als: (1) silychristin, (2) silydianin, (3) silybin A, (4) silybin B, (5) isosilybin A en (6) isosilybin B, respectievelijk.
Hoe melkdistel extraheren?
In tegenstelling tot de meeste kruiden, melkdistel zaden niet erg extract goed in water, dus probeer niet om een kopje thee van hen te maken! Eet in plaats daarvan de verse gemalen zaden, of krijg een capsule van goede kwaliteit. Als je de zaden gebruikt, koop ze dan heel en maal ze vervolgens indien nodig (ik gebruik een koffiemolen om er een grof poeder van te maken). De zaden smaken vettig, zoet en bitter in één keer - misschien zijn ze een verworven smaak, maar ze zijn helemaal niet onaangenaam. Begin met het nemen van 1/2 tot 1 eetlepel per dag gestrooid op uw voedsel en kijk hoe het voelt voor u, het aanpassen van de hoeveelheid als je nodig hebt.
Ingrediënten
1 kop lauw water
1 kop 100 bewijs alcohol gebruik ik wodka
3/4 tot 1 kop mariadistel zaden gemalen indien mogelijk
Instructies
Steriliseer de Mason-pot die wordt gebruikt door deze ongeveer 10 minuten in kokend water te plaatsen of door deze gedurende 15 minuten op het rooster in de oven op ongeveer 250 graden te plaatsen.
Giet alle ingrediënten in een Mason pot.
Plaats een nieuw deksel op de pot en schroef het stevig vast met een ring.
Schud de pot ongeveer 1 minuut krachtig.
Zet de pot vijf weken op een koele donkere plaats.
Schud de pot dagelijks om ervoor te zorgen dat de mariadistelzaden niet naar de bovenkant drijven en volledig doordrenkt raken met de alcohol en het water.
Zeef aan het einde van het aangegeven aantal weken de mariadistel weg van de vloeistof door middel van een fijnmazige zeef – houd de vloeistof. Als u geen fijnmazige zeef heeft, gebruik dan een klein vergiet en/of bekleed een vergiet met verschillende koffiefilters om de openingen kleiner te maken.
Hoe lang duurt het voordat de mariadistel in werking treedt?
Mariadistelzaad kan levercellen beschermen tegen giftige chemicaliën en medicijnen. Het lijkt ook bloedsuikerverlagende, antioxiderende en ontstekingsremmende effecten te hebben.
Verbetering van oxidatieve stressparameters werd consequent opgemerkt na zes maanden behandeling met een gespecialiseerd systeem voor de levering van mariadistel (2). Verbetering van oxidatieve stresspatronen is verantwoordelijk voor verbeterde insulinesignalering en levercelwerking.
Hoe lang moet de mariadistel worden ingenomen? (Mariadistel DOSERING)
Mariadistel wordt beschouwd als veilig in doseringen van 420 mg/dag oraal in verdeelde doses gedurende maximaal 41 maanden. Een bron suggereert dagelijkse doses van 12 tot 15 g droog fruit voor dyspepsie en aandoeningen van het galstelsel, terwijl een extract met 200 tot 400 mg/dag silymarine als effectief wordt beschouwd bij verschillende leveraandoeningen.
Voordelen van mariadistel
1. Ondersteunt de gezondheid van de lever
Een van de meest voorkomende toepassingen van mariadistel is het behandelen van leverproblemen. Een studie uit 2016 vond dat mariadistel verbeterde dieet-geïnduceerde leverschade bij muizen. Er is meer bewijs nodig om te bewijzen dat mariadistel de menselijke lever op dezelfde manier ten goede komt. Onderzoekers theoretiseren echter dat het dat wel doet. Het actieve ingrediënt in mariadistel, silymarine, werkt als een antioxidant door de productie van vrije radicalen te verminderen. Wetenschappers denken dat dit een ontgiftend effect creëert, daarom is het melkdistel kan gunstig zijn voor leverproblemen.
Totdat er meer onderzoek wordt gedaan, wordt mariadistel echter niet aanbevolen als primaire behandelingsoptie voor leverproblemen. Maar het kan een nuttige aanvullende behandeling zijn om te proberen.
2. Bevordert de gezondheid van de huid
Mariadistelolie kan topisch worden gebruikt om de gezondheid van de huid te verbeteren.
Mariadistel kan helpen om een gezonde huid te bevorderen. Een studie uit 2015 vond dat mariadistel hielp bij het verbeteren van inflammatoire huidaandoeningen wanneer het op de huid van muizen werd aangebracht.
Mariadistel bleek ook antioxiderende en anti-aging effecten te hebben op menselijke huidcellen in een laboratoriumomgeving in een andere studie.
Verder onderzoek naar mensen is nodig om te bepalen welke voordelen een persoon kan verwachten van het aanbrengen van mariadistel op zijn huid.
3. Verlaagt cholesterol
Een hoog cholesterolgehalte kan leiden tot problemen met de gezondheid van het hart en de kans op een beroerte vergroten.
Een studie uit 2006 suggereert dat mariadistel een belangrijke rol kan spelen bij het verlagen van het cholesterolgehalte. Het bleek dat het cholesterolgehalte lager was bij mensen die mariadistel gebruikten om diabetes te behandelen dan mensen die een placebo namen.
4. Ondersteunt gewichtsverlies
Uit eerste dieronderzoek dat in 2016 werd uitgevoerd, bleek dat silymarine gewichtsverlies veroorzaakte bij muizen die een dieet kregen dat bedoeld was om gewichtstoename te veroorzaken.
Dit suggereert dat mariadistel gunstig kan zijn voor diegenen die willen afvallen. Meer onderzoek naar de effecten van mariadistel op gewichtsverlies bij mensen is echter nodig om dit te bevestigen.
5. Vermindert insulineresistentie
Een studie op muizen vond melkdistel extract hielp om insulineresistentie te verminderen. Insulineresistentie is een probleem voor mensen met diabetes type 2.
Hoewel dit onderzoek suggereert dat mariadistel een rol zou kunnen spelen bij diabetesbeheer, is er meer onderzoek nodig om te bevestigen of mariadistel insulineresistentie vermindert en diabetesmanagement ondersteunt.
6. Verbetert allergische astmasymptomen
Het actieve ingrediënt in mariadistel kan helpen om ontstekingen te verminderen. Een studie uit 2012 vond dat silymarine hielp beschermen tegen ontstekingen in de luchtwegen van muizen met allergisch astma.
Meer onderzoek is nodig om te zien of silymarine astmasymptomen bij mensen ten goede komt.
7. Beperkt de verspreiding van kanker
Mariadistel kan helpen om de verspreiding van bepaalde soorten kanker te stoppen. Een 2016 review vond dat melkdistel extract remde de groei van kankercellen in colorectale kanker.
Meer onderzoek is nodig om te bepalen hoe mariadistel kan worden gebruikt om kanker te helpen bestrijden.
8. Ondersteunt de gezondheid van de botten
Mariadistelthee kan helpen om botverlies veroorzaakt door een gebrek aan oestrogeen te voorkomen. Mariadistel kan een essentiële rol spelen bij het ondersteunen van de gezondheid van de botten. Een studie uit 2013 wees uit dat mariadistel hielp botverlies te voorkomen. De studie keek specifiek naar botverlies veroorzaakt door een tekort aan oestrogeen. Het is nog niet duidelijk of mariadistel even gunstig is voor botverlies met een andere oorzaak. Verdere studies zijn nodig voordat het veilig is om te concluderen dat mariadistel de botgezondheid bij mensen ondersteunt.
9. Verbetert de cognitie
Een studie uit 2015 wees uit dat mariadistel de weerstand tegen oxidatieve stress verhoogde. Oxidatieve stress is een mogelijke oorzaak van de ziekte van Alzheimer.
Op deze manier kan mariadistel helpen de cognitie te verbeteren en degeneratieve aandoeningen te behandelen die de geest beïnvloeden. Meer onderzoek naar mensen is nodig om de effecten van mariadistel op cognitie te bevestigen.
10. Verhoogt het immuunsysteem
Mariadistel kan helpen de immuunrespons van een persoon te versterken en hen te helpen infecties te bestrijden.
Een studie uit 2016 naar een diermodel wees uit dat mariadistelextract de immuniteit verbeterde bij consumptie. Een oudere studie vond dat mariadistel extract had een positief effect op de immuunrespons bij de mens.
Meer studies met menselijke deelnemers zijn nodig voordat wetenschappers met zekerheid kunnen zeggen dat mariadistel het immuunsysteem van een persoon stimuleert.
Melkdistel bijwerkingen
Mariadistel lijkt weinig bijwerkingen te hebben, zelfs wanneer genomen voor meerdere jaren. Sommige mensen hebben misselijkheid, diarree, jeuk en een opgeblazen gevoel.
Voor bulkmelkdistelpoeder u contact met ons opnemen viaherbext@undersun.com.cn
Referenties:https://academic.oup.com/chromsci/article/53/2/366/307144
https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/B9780128093801000152
https://www.cambridgenaturals.com/blog/milk-thistle-food-for-the-liver
https://www.survivalsullivan.com/milk-thistle-extract/
https://www.webmd.com/digestive-disorders/milk-thistle-benefits-and-side-effects
https://www.medicalnewstoday.com/articles/320362#how-to-use-milk-thistle
